作者：哈哈球

　　天气已经如此寒冷，可身无sci论文傍身的我却在冷风中瑟瑟发抖。好在小编苦读了几年文献，终悟出了撰写1-2分的文章套路：5大法宝和1个必要通路，让这个寒冬瞬间暖了起来。五大法宝是，增殖，凋亡，迁移，浸润和周期；必要通路是五大法宝中的常见信号通路。

　　这里小编在PUBMED上输入随意的关键词miRNA和proliferation，那么在检索条例中出现的的第一篇文章就是1.66分的文章，小编就举这个栗子，帮大家带入1-2分文章的套路分析吧！

从题目可知本文的主要内容就是小RNA miR-377通过抑制靶向mRNA -VEGFA的表达抑制胃癌细胞的增殖和迁移。那么快快来捋一捋这1-2分文章的套路节奏吧！

　　1 首先在胃癌组织和细胞中，检测出miRNA-377的表达水平下降

　　qRT-PCR技术检测在86例胃癌组织中miRNA-377的表达与正常胃组织相比显著下降；在细胞系中，5种胃癌细胞系比正常胃细胞中miRNA-377的表达水平也是呈下降趋势。

2 miR-377的过表达抑制了GC细胞增殖

　　作者在五种细胞系中，选择了miR-377表达水平最低的细胞系SGC-7901，并且在该细胞系中过表达miR-377，利用克隆形成实验和CCK8技术检测过表达miR-377后，对GC细胞增殖的影响。

　　结果表明：过表达miR-377后克隆形成活性下降，以及CCK8技术显示细胞增殖活性下降。

选择表达水平最高的MKN-45细胞系做miR-377的敲减，利用克隆形成实验和CCK8技术检测干扰miR-377表达后，对GC细胞增殖的影响。

　　结果表明：在MKN-45细胞中，采用miR-377抑制剂后，增加了MKN-45细胞的克隆形成活性和增殖活性。

3miR-377的影响了GC细胞的迁移和浸润

　　Wound-healing和transwell技术分析结果显示：过表达miR-377后，SGC-7901的细胞迁移和浸润活性与对照组相比显著缩短；

　　使用miR-377抑制剂以后，MKN-45细胞的迁移和浸润能力反而增强。

在SGC-7901细胞中过表达miR-377以后，细胞的增殖能力下降；在MKN-45细胞中转染miR-377的抑制剂以后，细胞的增殖能力反而增强。

4VEGFA是miR-377的靶向RNA

　　作者利用了3个数据库分别是TargetScan, miRanda, 和miRWalk预测出VEGFA的3,UTR与miR-377相结合。

　　荧光素酶报告基因结果显示miR-377与VEGFA的3,UTR区相结合，尤其是当突变VEGFA的3,UTR区时，VEGFA的表达水平没有变化。

　　蛋白技术检测，在SGC-7901中过表达miR-377后，VEGFA的表达水平下降；反之，在MKN-45细胞系中使用抑制剂后，VEGFA的表达水平增高。

5 VEGFA反过来影响了miR-377在GC细胞中的上调

　　将pcDNA 3.1-VEGFA质粒转染入过表达miR-377的SGC-7901细胞系后，CCK8结果与过表达组相比显著增加了细胞增殖的活性和能力；transwell实验结果也显示浸润能力得到缓解。

这些结果显示miR-377能够通过下调VEGFA的表达抑制细胞的增殖。

　　以上就是本文的套路内容，同学们趁着周末赶快收集凋亡，迁移，浸润，增殖等的数据，写一篇通路文章，等着过年的时候抱着取暖吧！

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